কিভাবে ফসফেট Buffered সালাইন (পিবিএস)

ফসফেট buffered সালাইন (পিবিএস) একটি বাফার সমাধান যা সাধারণত ইমিউনোস্টোকেমিক্যাল (আইএইচসি) স্টেইনের জন্য ব্যবহৃত হয় এবং এটি প্রায়শই জৈবিক গবেষণায় ব্যবহৃত হয়। পিবিএস একটি জল-ভিত্তিক লবণ সমাধান যার মধ্যে সোডিয়াম হাইড্রোজেন ফসফেট, সোডিয়াম ক্লোরাইড এবং কিছু ক্ষেত্রে পটাসিয়াম ক্লোরাইড এবং পটাসিয়াম ডিহাইড্রোজেন ফসফেট রয়েছে।

Immunohistochemical স্টেইনলেস

ইমিউনহাইস্টোকেমিস্টিটি জৈব টিস্যুতে বিশেষ করে অ্যান্টিজেনগুলির জন্য বাঁধনকারী অ্যান্টিবডিগুলির নীতি ব্যবহার করে একটি টিস্যু বিভাগের কোষে প্রোটিন হিসাবে অ্যান্টিজেন সনাক্ত করার প্রক্রিয়া বোঝায়। ইমিউনোফ্লোসেসেন্ট স্টেইন প্রথম ইমিউনোস্টোকেমিক্যাল স্টেইনলেস পদ্ধতি।

অ্যান্টিজেন-অ্যান্টিবডি বাঁধাই প্রতিক্রিয়ার কারণে ফ্লুরোসেন্স ডাই ব্যবহার করে অ্যান্টিবডিগুলির সাথে মিলিত হলে অ্যান্টিজেন দৃশ্যমান হয়। এটি একটি ফ্লুরোসেন্ট মাইক্রোস্কোপ অধীনে একটি নির্দিষ্ট তরঙ্গদৈর্ঘ্য উত্তেজনাপূর্ণ আলো দ্বারা সক্রিয় হয় যখন এই প্রক্রিয়া ঘটে।

সমাধানগুলির অক্সোমোলিটি এবং আয়ন সংকোচন মানুষের দেহের সাথে মিলে যায় - তারা আইসোটোনিক।

পিবিএস বাফার জন্য একটি প্রণালী

আপনি বিভিন্ন উপায়ে পিবিএস প্রস্তুত করতে পারেন। একাধিক সূত্র আছে। এদের মধ্যে কিছুতে পটাসিয়াম থাকে না, অন্যদিকে ক্যালসিয়াম বা ম্যাগনেসিয়াম থাকে।

এই রেসিপি অপেক্ষাকৃত সহজ। এটি 10X পিবিএস স্টক সমাধান (0.1 এম) এর জন্য। যাইহোক, আপনি 1 এক্স স্টক সমাধানও তৈরি করতে পারেন, অথবা এই 10X রেসিপি দিয়ে শুরু করুন এবং এটি 1X এ নিমজ্জিত করুন। পুরো প্রক্রিয়াটি প্রায় 10 মিনিট সময় নেয় এবং টিভন যোগ করার জন্যও একটি বিকল্প সরবরাহ করা হয়।

আপনি পিবিএস বাফার করতে হবে কি

• সোডিয়াম ফসফেট monobasic (নির্গমনশীল)
• সোডিয়াম ফসফেট ডিবাসিক (নির্গমনশীল)
• সোডিয়াম ক্লোরাইড
• স্কেল এবং নৌকা ওজন
• চৌম্বক stirrer এবং আলোড়ন বার
• একটি পিএইচ প্রোব যা ক্যালিব্রেটেড এবং পিএইচ সমন্বয় করার জন্য উপযুক্ত সমাধান
• 1L ভলিউমেটিক ফ্লাস্ক
• টেন 20 (ঐচ্ছিক)

কিভাবে পিবিএস বাফার করতে

1. 10.9 গ্রাম নির্গমনশীল সোডিয়াম ফসফেট ডিবাসিক (Na2HPO4), 3.2 গ্রাম নির্গমনশীল সোডিয়াম ফসফেট monobasic (NaH2PO4), এবং 90 গ্রাম সোডিয়াম ক্লোরাইড (NaCl)। মাত্র 1L নিস্তেজ জল অধীনে বরখাস্ত।
2. পিএইচ 7.4 এ অ্যাডজাস্ট করুন এবং 1L এর চূড়ান্ত ভলিউমের সমাধানটি সমাধান করুন।
3. ব্যবহারের আগে 10X Dilute এবং প্রয়োজনে পিএইচডি পুনরায় সমন্বয়।
4. আপনি 5 এমএল টিভ ২0 টি 1L সমাধান যুক্ত করে একটি পিবিএস সমাধান 0.5 শতাংশ টিভিন ২0 সহ করতে পারেন।

পিবিএস বাফার তৈরীর জন্য টিপস

PBS সমাধান তৈরি করার পরে কক্ষ তাপমাত্রায় বাফারটি সংরক্ষণ করুন।

অ-নির্বীজনকারী পদার্থগুলি প্রতিস্থাপিত করা যেতে পারে তবে যোগ করা জল অণুগুলিকে মিটমাট করার জন্য আপনাকে যথাযথ ভর পুনর্বিবেচনা করতে হবে।

পিবিএস বাফার ব্যবহার

ফসফেট buffered saline অনেক ব্যবহার আছে কারণ এটি অধিকাংশ কোষের isotonic এবং অ বিষাক্ত। এটি পদার্থকে পাতলা করার জন্য ব্যবহার করা যেতে পারে এবং এটি প্রায়শই কোষের পাত্রে খিঁচুনিতে ব্যবহৃত হয়। জৈব যৌগকে শুকানোর জন্য বিভিন্ন পদ্ধতিতে পিবিএস ব্যবহার করা যেতে পারে কারণ এটির মধ্যে পানির অণু পদার্থ-প্রোটিনের চারপাশে গঠন করা হবে। এটি "শুকিয়ে" এবং একটি কঠিন পৃষ্ঠ immobilized করা হবে।

কোষ ধ্বংস করার জন্য পিএইচ স্থায়ী এবং সামঞ্জস্যপূর্ণ।

পদার্থের সাথে সম্পর্কযুক্ত পানির পাতলা ফিল্মটি ডিনাট্রুশন বা অন্যান্য রূপান্তরিত পরিবর্তনগুলিকে বাধা দেয়। কার্বনট বাফারগুলি একই উদ্দেশ্যে ব্যবহার করা যেতে পারে তবে কম কার্যকারিতা সহ।

Ellipsometry প্রোটিন adsorption পরিমাপ যখন পিবিএস একটি রেফারেন্স বর্ণালী নিতে ব্যবহার করা যেতে পারে।