কিভাবে একটি ব্যাকটেরিয়াল সংস্কৃতি ফ্রিজ-শুকনো (Lyophilization)

ফ্রিজ-শুকানোর, যা লিওফিলাইজেশন বা ক্রিডডিসিকেশন নামেও পরিচিত, এটি হিমায়িত (এবং তারপরে ভ্যাকুয়ামের নীচে রাখা) কোনও পণ্য থেকে পানি অপসারণের প্রক্রিয়া যা একটি কঠিন তরল থেকে কোনও তরল পদার্থ ছাড়াই পরিবর্তিত হয়। বরফ (বা অন্যান্য হিমায়িত সলভেন্টস) উৎপাদনের মাধ্যমে একটি পণ্য থেকে সরিয়ে ফেলা হয় এবং নির্গমন প্রক্রিয়ার মাধ্যমে আবদ্ধ পানি অণুগুলি সরিয়ে ফেলা হয়।

Lyophilization মূলসূত্র

দীর্ঘ সময়ের জন্য ব্যাকটেরিয়া, ছত্রাক, খামির বা অন্যান্য মাইক্রোজেনিজম সংস্কৃতি সংরক্ষণের অন্যতম সেরা উপায় হ'ল ফ্রিজ-শুকানোর প্রক্রিয়াটি ব্যবহার করা। এই ছোট পরীক্ষাগার পদ্ধতিটি বাণিজ্যিকভাবে উপলব্ধ ফ্রীজ-ড্রায়ারের সাথে গ্রহণ করা যেতে পারে যা আপনার সংস্কৃতি সংগ্রহ সংরক্ষণ করবে। কারণ লিওফিলাইজেশন শুকানোর সবচেয়ে জটিল এবং ব্যয়বহুল ফর্ম, সাধারণত প্রক্রিয়াটি সূক্ষ্ম, তাপের সংবেদনশীল তাপমাত্রায় উচ্চ মানের। ফ্রিজে ক্ষতিগ্রস্ত না হওয়া পদার্থ সাধারণত লায়ফিলাইজড হতে পারে যাতে ফ্রিজে স্টোরেজ অপ্রয়োজনীয় হয়।

এই প্রক্রিয়াটি তিন ঘণ্টার কম সময় নিতে পারে এবং ২4 ঘন্টা পর্যন্ত সংস্কৃতি বৃদ্ধির সময় অন্তর্ভুক্ত করতে পারে না।

লাইফফিলাইজেশনের ধাপে ধাপে প্রক্রিয়া

1. প্রথম, এলবি বা অন্য উপযুক্ত পুষ্টির আগর প্লেটের ক্ষুদ্রতর প্রাণীর একটি রাতারাতি সংস্কৃতি বা লন বাড়ান।
2. পরবর্তী সময়ে, ক্যাপ (রাবার স্টপপারগুলি) উপরের দিকে নিচুভাবে স্থাপন করে, সময়ের সাথে সাথে অটোক্ল্যাভিংয়ের দ্বারা স্টাইলাইল ক্রিপ-ক্যাপ ভিয়াল তৈরি করুন। Autoclaving আগে টিউব ভিতরে সংস্কৃতি সনাক্তকরণ সঙ্গে প্রিন্ট কাগজ লেবেল রাখুন। বিকল্পভাবে, sterility জন্য পরিকল্পিত ক্যাপ সঙ্গে টিউব ব্যবহার করুন।
3. প্লেট 4 এমএল lyophilization বাফার যোগ করুন। যদি প্রয়োজন হয়, সেলাই একটি নির্বীজিত গ্লাস রড ব্যবহার করে স্থগিত করা যেতে পারে।

1. দ্রুত sterilized vials সংস্কৃতি সাসপেনশন হস্তান্তর। ভয়াল প্রতি আনুমানিক 1.5 এমএল যোগ করুন। রাবার টুপি সঙ্গে সীল।
2. একটি -20 ডিগ্রী সেলসিয়াস ফ্রিজার মধ্যে vials স্থাপন দ্বারা vials ভিতরে সংস্কৃতি সাসপেনশন নিশ্চল।
3. সংস্কৃতিগুলি হিমায়িত হয়ে গেলে, এটি চালু করে ফ্রিজ-ড্রায়ার প্রস্তুত করুন এবং যথাযথ তাপমাত্রা এবং ভ্যাকুয়াম অবস্থার স্থিতিশীলতার জন্য সময় দেওয়ার অনুমতি দিন। আপনি যে ফ্রিজ-ড্রায়ারের বিশেষ ব্র্যান্ডটি ব্যবহার করছেন তার জন্য নির্মাতার নির্দেশ অনুসারে এটি করুন।
4. যত্নসহকারে, এবং সন্দেহজনকভাবে, শিয়ালের উপরে শিথিলভাবে ভিয়াল ক্যাপগুলি রাখুন, যাতে আর্দ্রতা ফ্রিজ-শুকানোর প্রক্রিয়া চলতে পারে এবং ভিয়ালগুলিকে একটি ফ্রিজ-ড্রায়ার চেম্বারে রাখে। নির্মাতার নির্দেশ অনুযায়ী চেম্বারে ভ্যাকুয়াম প্রয়োগ করুন।
5. সংস্কৃতি সময় সম্পূর্ণরূপে lyophilize (শুষ্ক আউট) অনুমতি দিন। প্রতিটি নমুনার ভলিউম এবং আপনার কত নমুনার উপর নির্ভর করে এটি কয়েক ঘণ্টার মধ্যে রাতারাতি নিতে পারে।
6. প্রস্তুতকারকের নির্দেশ অনুসারে ফ্রিজ-ড্রায়ার চেম্বার থেকে নমুনাগুলি সরান এবং অবিলম্বে রাবার ক্যাপগুলি দিয়ে শিয়ালগুলি সীল করুন, তারপর ক্রিপ শীর্ষ।
7. কক্ষ তাপমাত্রায় lyophilized সংস্কৃতি সংগ্রহ সংরক্ষণ করুন।

পণ্য আপনি প্রয়োজন হবে

• ফ্রিজ-ড্রায়ার
• পুষ্টি বা অন্যান্য উপযুক্ত আগর প্লেট (এবং সংস্কৃতির বৃদ্ধি করতে ইনকুবেটর)
• কাচ যষ্টি
• Lyophilization বাফার
• রাবার স্টপারগুলির সাথে চিংড়ি-শীর্ষ শীট (এবং ক্যাপগুলি প্রয়োগ করার জন্য একটি ক্রেপার)
• হিমায়ক

_{রেফারেন্স:এসপি বৈজ্ঞানিক। ফ্রিজ শুকনো মৌলিক মূলনীতি। http://www.spscientific.com/freeze-drying-lyophilization-basics/}