পলিমেরেজ চেইন প্রতিক্রিয়া মাধ্যমে ডিএনএ সংযোজন

পিসিআর নিয়ন্ত্রিত অবস্থার অধীনে ডিএনএ পলিমেরেজ এনজাইম ব্যবহার করে একাধিক কপি তৈরি করে, ডিএনএর সেগমেন্টগুলিকে বাড়ানোর জন্য পলিমেরেজ শিকল প্রতিক্রিয়া, একটি আণবিক জীববিদ্যা কৌশল। একটি ডিএনএ সেগমেন্ট বা জিনের একটি কপি হিসাবে সামান্য হিসাবে কপি এবং অন্যান্য ভিজ্যুয়ালাইজেশন কৌশল ব্যবহার সনাক্তকরণ অনুমতি, মিলিয়ন কপি মধ্যে ক্লোন করা যেতে পারে।

1983 সালে বিকাশিত, পিসিআর পদ্ধতিটি ডিএনএ সিকোয়েন্সিং এবং ব্যক্তিগত জিনগুলিতে নিউক্লিওটাইডের ক্রম সনাক্ত করার পক্ষে সম্ভব করেছে। পদ্ধতিটি থার্মাল সাইক্লিং বা ডিএনএ গলন এবং প্রতিলিপি জন্য প্রতিক্রিয়া পুনরাবৃত্তি গরম এবং শীতল ব্যবহার করে। পিসিআর চলতে থাকায়, "নতুন" ডিএনএটি প্রতিরূপের জন্য একটি টেমপ্লেট হিসাবে ব্যবহৃত হয় এবং একটি শৃঙ্খল প্রতিক্রিয়া সূচিত হয়, যার ফলে ডিএনএ টেমপ্লেটটি দ্রুতগতিতে বাড়ানো হয়।

প্রোটিন প্রকৌশল, ক্লোনিং, ফরেনসিকস (ডিএনএ আঙ্গুলের ছাপ), পিতামাতার পরীক্ষা, বংশগত এবং / অথবা সংক্রামক রোগের নির্ণয় এবং পরিবেশগত নমুনার বিশ্লেষণ সহ পিসিআর কৌশলগুলি জৈব প্রযুক্তির অনেক ক্ষেত্রে প্রয়োগ করা হয়।

ফরেনসিকগুলিতে, বিশেষ করে, পিসিআরটি বিশেষভাবে উপকারী কারণ এটি ডিএনএর সর্বনিম্ন পরিমাণ এমনকি বৃদ্ধি করে। হাজার হাজার বছর বয়সী ডিএনএ বিশ্লেষণের জন্য পিসিআর ব্যবহার করা যেতে পারে, এবং এই কৌশলগুলি বিশ্বব্যাপী 800,000 বছর বয়সী ম্যামি থেকে মমি পর্যন্ত সবকিছু সনাক্ত করতে ব্যবহার করা হয়েছে।

নিম্নরূপ পিসিআর পদ্ধতি:

• আরম্ভ: এই ধাপটি শুধুমাত্র ডিএনএ পলিমারেসগুলির জন্য প্রয়োজন যা হট-প্রারম্ভিক পিসিআর প্রয়োজন। প্রতিক্রিয়াটি 94 থেকে 96 ডিগ্রি সেলসিয়াসে উত্তপ্ত এবং 1-9 মিনিট ধরে রাখা হয়।
• Denaturation: প্রক্রিয়া শুরু করার প্রয়োজন হয় না, denaturation প্রথম ধাপ। প্রতিক্রিয়া 20-30 সেকেন্ডের জন্য 94-98 ডিগ্রি সেলসিয়াস গরম করা হয়। ডিএনএ টেম্পলেটের হাইড্রোজেন বন্ডগুলি ব্যাহত হয় এবং একক-ফাঁকা ডিএনএ অণু তৈরি হয়।
• পোড়ানো: প্রতিক্রিয়া তাপমাত্রা 50 থেকে 65 ডিগ্রি সেলসিয়াস কম এবং 20-40 সেকেন্ডের জন্য অনুষ্ঠিত হয়। প্রাইমার্স একক ফাঁকা ডিএনএ টেমপ্লেট anneal। তাপমাত্রা এই ধাপের সময় অত্যন্ত গুরুত্বপূর্ণ। এটি খুব গরম হলে, প্রাইমার আবদ্ধ নাও হতে পারে। এটি খুব ঠান্ডা হলে, প্রাইমার অসম্পূর্ণভাবে আবদ্ধ হতে পারে। প্রাইমার ক্রম টেমপ্লেট ক্রম সাথে ঘনিষ্ঠভাবে যখন একটি ভাল বন্ড গঠিত হয়।

• এক্সটেনশন / প্রতান: এই পদক্ষেপের সময় তাপমাত্রা পলিমেরেজের ধরন অনুসারে পরিবর্তিত হয়। ডিএনএ পলিমেরেজ একটি সম্পূর্ণ নতুন ডিএনএ strand সংশ্লেষ।
• চূড়ান্ত বর্ধিতকরণ: এই পদক্ষেপটি চূড়ান্ত পিসিআর চক্রের পরে 5-15 মিনিটের জন্য 70-74 ডিগ্রি সেলসিয়াসে সঞ্চালিত হয়।
• চূড়ান্ত হোল্ড: এই পদক্ষেপ ঐচ্ছিক। তাপমাত্রা 4-15 ডিগ্রি সেলসিয়াসে রাখা হয় এবং প্রতিক্রিয়া বন্ধ করে।

পদ্ধতি তিন পর্যায়ে বিভক্ত করা হয়:

• সূচকীয় সংযোজন: প্রতিটি চক্র সময়, পণ্য (প্রতিরূপ করা হচ্ছে যে ডিএনএ নির্দিষ্ট অংশ) দ্বিগুণ হয়।
• স্তর স্তর বন্ধ: ডিএনএ পলিমেরেজ কার্যকলাপ হারায় এবং প্রতিক্রিয়া খাওয়া হিসাবে, প্রতিক্রিয়া ধীর।
• মালভূমি: কোন পণ্য accumulates।