কয়েক ধাপে একটি TAE বাফার কীভাবে শিখবেন তা শিখুন

টিএইই বাফার ট্রিস বেস, এসিটিক এসিড এবং ইডিটিএ (ট্রিস-অ্যাসেটেট-ইডিটিএ) গঠিত একটি সমাধান। এটি ঐতিহাসিকভাবে পিসিআর এম্প্লিফিকেশন, ডিএনএ পরিশোধন প্রোটোকল বা ডিএনএ ক্লোনিং পরীক্ষার ফলে ডিএনএ পণ্যগুলির বিশ্লেষণে অ্যাগারোজ জেল ইলেক্ট্রোফোরেসিসের জন্য ব্যবহৃত সবচেয়ে সাধারণ বাফার।

এই বাফার একটি কম ionic শক্তি এবং কম বাফারিং ক্ষমতা আছে। এটি ডিএনএর বৃহত (> ২0 কেবি) টুকরাগুলির ইলেক্ট্রোফোরেসিসের জন্য উপযুক্ত এবং এটি প্রায়শই প্রতিস্থাপিত হবে এবং দীর্ঘ (> 4 ঘন্টা) জেল রান বারের জন্য পুনর্বিবেচনার প্রয়োজন হবে। মনে রাখবেন, আপনি বাফারের কয়েকটি ব্যাচ বিবেচনা করতে পারেন।

বাফারটি সহজ করা এবং পদক্ষেপগুলি দ্রুত সঞ্চালিত করা যেতে পারে, এক সময়ে একাধিক ব্যাচ তৈরি করা বিশেষভাবে সময় গ্রহণকারী বা টেনে আনতে কঠিন হওয়া উচিত নয়। নীচের নির্দেশাবলী ব্যবহার করে, এটি TAE বাফারটি তৈরি করতে মাত্র 30 মিনিট সময় নিতে হবে। এখানে কিভাবে:

ইডিটিএ একটি স্টক সমাধান প্রস্তুত

একটি ইডিটিএ (ethylenediamine tetraacetic অ্যাসিড) সমাধান এগিয়ে প্রস্তুত করা হয়। পিএইচ 8.0 এর সাথে সামঞ্জস্য না হওয়া পর্যন্ত EDTA সম্পূর্ণরূপে সমাধান করবে না। 500 এমিলিটার স্টক সমাধান 0.5 এম ইডিটিএর জন্য, ইডিটিএ ডিসডিয়াম লবণ (FW = 372.2) এর 93.05 গ্রাম। 400 মিলিিলিটার ডিওনিযুক্ত পানিতে দ্রবীভূত করুন এবং সোডিয়াম হাইড্রক্সাইড (NaOH) সহ পিএইচ সমন্বয় করুন। 500 মিলিলিটারের একটি চূড়ান্ত ভলিউমের সমাধান শীর্ষস্থানে।

TAE একটি স্টক সমাধান আপ চাবুক

টিআইইর ২4২ গ্রামের ট্রিস বেস (FW = 121.14) ওজন করে প্রায় 750 মিলিলিটারের ডিওনিয়াইজড জলে দ্রবীভূত করে টিএইচ-এর একটি ঘনীভূত (50x) স্টক সমাধান করুন। সতর্কতার সাথে গ্ল্যামিয়াল এসিডের 57.1 মিলিলিটার এবং 0.5 মিটার EDTA (PH 8.0) এর 100 মিলিলিটার যোগ করুন। তারপরে, 1 লিটারের চূড়ান্ত ভলিউমের সমাধানটি সমন্বয় করুন। এই স্টক সমাধান কক্ষ তাপমাত্রায় সংরক্ষণ করা যেতে পারে। এই বাফারের পিএইচ সমন্বয় করা হয় না এবং প্রায় 8.5 হওয়া উচিত।

TAE একটি কাজ সমাধান প্রস্তুত

1x টিএইই বাফারের কাজ সমাধান সহজভাবে ডিওনযুক্ত পানিতে 50x দ্বারা স্টক সমাধানটি কমিয়ে দেয়। চূড়ান্ত দ্রাবক ঘনত্ব 40 মিমি হয়। Tris-Acetate এবং 1 এমএম EDTA। বাফার এখন একটি agarose জেল চলমান ব্যবহারের জন্য প্রস্তুত।

আপনি বাফার জন্য কি প্রয়োজন

যেহেতু TAE বাফারটি শুধুমাত্র দ্রুত এবং সহজ নির্দেশের সেট করার প্রয়োজন হয়, তার জন্য প্রয়োজনীয় উপকরণগুলির সংখ্যা অত্যধিক নয়। আপনি শুধু EDTA Disodium লবণ, ট্রিস বেস, এবং গ্লাসিয়াল অ্যাসেটিক অ্যাসিড প্রয়োজন হবে।

উপযুক্ত হিসাবে, বাফার এছাড়াও একটি পিএইচ মিটার এবং ক্রমাঙ্কন মান প্রয়োজন বোধ করা হয়। আপনাকে 600 মিলিলিটার এবং 1500 মিলেলাইটার বেকার বা ফ্লাস্ক এবং গ্র্যাজুয়েটেড সিলিন্ডারও দরকার। অবশেষে, আপনি deionized জল, বার আলোড়ন, এবং প্লেট আলোড়ন প্রয়োজন হবে।

মোড়ক উম্মচন

আপনি কোথায় বাফার করতে চান - একটি স্কুল সাইট, একটি কাজের সাইট, বা অন্য কোন স্থানে, যেমন আপনার বাড়ির? আপনি TAE বাফারের জন্য উপরের সমস্ত সামগ্রী নিশ্চিত করতে শুরু করার আগে জায়টি পরীক্ষা করুন।

যদি আপনি উপকরণের জন্য অর্থ প্রদান করতে না চান তবে আপনার বাড়ির বাইরের বাফারটি বাছাই করা বাঞ্ছনীয়। আপনি সহজেই আপনার প্রয়োজনীয় সামগ্রীর অর্ডার দিতে পারেন বা তাদের জন্য একটি বিশেষ দোকান পরিদর্শন করতে পারেন।